細(xi)胞培養基本概述:
細(xi)胞的生長(chang)需(xu)要(yao)營(ying)養環境(jing),用(yong)於(yu)維(wei)持(chi)細(xi)胞生長(chang)的(de)營(ying)養基質稱為(wei)培養基。培養基按其物理(li)狀態(tai)可(ke)分為(wei)液(ye)體(ti)培養基和固(gu)體(ti)培養基。液(ye)體(ti)培養基用(yong)於(yu)大(da)規(gui)模的(de)工業(ye)生產以及生理代(dai)謝(xie)等(deng)基本理論(lun)的研究工作(zuo)。液(ye)體(ti)培養基中(zhong)加入(ru)壹(yi)定的(de)凝(ning)固(gu)劑(ji)(如(ru)瓊(qiong)脂)或(huo)固(gu)體(ti)培養物(如(ru)麩皮(pi)、大(da)米等(deng))便(bian)成(cheng)為固(gu)體(ti)培養基。固(gu)體(ti)培養基為細(xi)胞的生長(chang)提供了壹(yi)個營(ying)養及通(tong)氣的表(biao)面,在(zai)這樣壹(yi)個營(ying)養表面上(shang)生產的(de)細(xi)胞可形成單個菌(jun)落。因(yin)此,固(gu)體(ti)培養基在(zai)細(xi)胞的分離(li)、鑒(jian)定、計(ji)數等方面起著(zhe)相(xiang)當(dang)重(zhong)要的(de)作用(yong)。從(cong)多(duo)細(xi)胞生物中(zhong)分離(li)所(suo)需(xu)要(yao)細(xi)胞和擴增(zeng)獲(huo)得的(de)細(xi)胞以及對(dui)細(xi)胞進(jin)行體(ti)外(wai)改(gai)造(zao),觀(guan)察(cha),必須解決細(xi)胞離體培養問題,同(tong)微(wei)生物細(xi)胞培養的難(nan)易相(xiang)比(bi),比較(jiao)困難(nan)的是來(lai)自(zi)多(duo)細(xi)胞生物的(de)單細(xi)胞培養,特(te)別(bie)是動物細(xi)胞的培養。
細(xi)胞培養泛指所(suo)有(you)體(ti)外(wai)培養,其含義(yi)是指從(cong)動物活(huo)體體(ti)內取出組織(zhi),於模擬體(ti)內(nei)生理環(huan)境(jing)等(deng)特(te)定(ding)的(de)體(ti)內(nei)條件下(xia),進(jin)行孵(fu)育(yu)培養,使之生存並(bing)生長(chang)。細(xi)胞培養工作(zuo)現(xian)已(yi)廣(guang)泛應(ying)用(yong)於(yu)生物學、醫學、新藥(yao)研發等(deng)各(ge)個領域(yu),成(cheng)為(wei)最(zui)重(zhong)要的(de)基礎科學之壹(yi)。

細(xi)胞培養
然而(er),細(xi)胞培養過(guo)程(cheng)中(zhong)極易被汙(wu)染(ran),以下(xia)列舉(ju)防(fang)止細(xi)胞培養汙染建議(yi):
1、從(cong)培養箱(xiang)取放細(xi)胞前,用(yong)酒精清潔雙手(或(huo)手套(tao)),盡量(liang)縮(suo)短開門(men)時間(jian)和減(jian)少(shao)開門(men)次(ci)數。培養瓶放入(ru)培養箱(xiang)前,用(yong)酒精消(xiao)毒(du)表(biao)面(mian),並(bing)稍等(deng)至酒精揮發後(hou)再(zai)放入(ru),以免(mian)培養箱(xiang)內滯留(liu)過(guo)多(duo)乙(yi)醇(chun)蒸氣。
2、操(cao)作的(de)時候防(fang)護服(fu)、口罩(zhao)、手套(tao)缺壹(yi)不(bu)可(ke)。操(cao)作前(qian),準(zhun)備好(hao)所有(you)實(shi)驗所需(xu)物品,以減(jian)少(shao)走(zou)動,物品需(xu)有(you)序(xu)擺放在(zai)超凈臺觸(chu)手可及的(de)地(di)方(fang),同(tong)時空留(liu)足(zu)夠操(cao)作空(kong)間(jian)。
3、操(cao)作時,試劑(ji)不(bu)用(yong)盡(jin)量(liang)及時蓋上(shang)蓋子(zi),移至操(cao)作區(qu)外(wai)圍,盡量不(bu)要(yao)從(cong)開口(kou)容器(qi)上(shang)經過(guo)。
4、使用(yong)移(yi)液(ye)槍(qiang)時,將(jiang)容器(qi)傾斜(xie)以便(bian)於(yu)移液(ye),切(qie)勿將(jiang)槍(qiang)桿碰觸(chu)瓶口(kou)及內(nei)壁。壹(yi)旦(dan)發生倒吸(xi)情(qing)況(kuang),要(yao)及時用(yong)酒精棉球(qiu)擦(ca)拭,以免(mian)液(ye)體(ti)殘留導致(zhi)細(xi)菌滋生。
5、先(xian)取(qu)試劑(ji)、耗(hao)材,再(zai)取(qu)移(yi)液(ye)槍(qiang)、an裝(zhuang)槍(qiang)頭。很多(duo)人習慣(guan)先(xian)an 裝(zhuang)槍(qiang)頭,然後(hou)去(qu)拿(na)試劑(ji)、耗(hao)材,殊(shu)不(bu)知(zhi)無(wu)意間(jian)槍(qiang)頭已(yi)經觸(chu)碰其(qi)他地(di)方(fang)導致(zhi)汙染(ran)。
6、向(xiang)廢(fei)液(ye)缸(gang)打廢(fei)液(ye)時,需(xu)輕柔(rou),以免(mian)造(zao)成(cheng)水(shui)花四(si)濺,汙染(ran)槍(qiang)頭、槍(qiang)體。實(shi)驗(yan)結束,及時倒掉(diao)廢(fei)液(ye)缸(gang)垃圾,沖(chong)洗(xi)之後(hou)噴灑(sa)酒精,放入(ru)超凈臺紫(zi)外(wai)照(zhao)射(she)殺菌。
7、凍(dong)存細(xi)胞時凍(dong)存管蓋(gai)子需(xu)擰緊(jin)。復(fu)蘇細(xi)胞時,從(cong)液(ye)氮罐(guan)取(qu)出凍(dong)存管,輕擰蓋子(zi),以確(que)認(ren)蓋(gai)子是否擰緊(jin)。鑷子夾(jia)住凍(dong)存管蓋(gai)子與管體交(jiao)界處,在(zai)37度水(shui)浴(yu)鍋(guo)中(zhong)快(kuai)速解凍(dong),水(shui)面不(bu)可(ke)超過(guo)凍(dong)存管蓋(gai)沿;不(bu)建(jian)議(yi)直接(jie)扔進(jin)水(shui)中(zhong),以免(mian)水(shui)滲入(ru)造(zao)成(cheng)汙(wu)染(ran)。操(cao)作過(guo)程(cheng)中(zhong),對於(yu)那種(zhong)模糊(hu)不(bu)清(qing)的(de)、妳(ni)不(bu)確(que)定(ding)的(de)有(you)沒有(you)汙(wu)染的,寧(ning)願認(ren)為(wei)是有(you)菌(jun)的棄掉(diao)!也不(bu)要(yao)心(xin)存僥幸!