在
ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)實驗(yan)過(guo)程中(zhong)會(hui)出現"花板(ban)"現象,這種(zhong)現象影(ying)響檢(jian)驗(yan)結(jie)果(guo)的正確判(pan)讀(du),對(dui)工作(zuo)造(zao)成(cheng)壹定的不利(li)影(ying)響,壹旦出(chu)現“花板(ban)”,實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)必須放(fang)棄(qi),重(zhong)新進行(xing),不(bu)僅浪費(fei)物料和(he)時間(jian),而且(qie)還會出(chu)現樣本(ben)量缺少(shao)、交叉(cha)汙染(ran)、報告(gao)延遲(chi)等(deng)壹系(xi)列(lie)問(wen)題。
影(ying)響因(yin)素分(fen)析(xi)如(ru)下:
壹、試(shi)劑(ji)因(yin)素
正確保(bao)存及使用有效試(shi)劑(ji)。使(shi)用過(guo)期(qi)試(shi)劑(ji)及(ji)底物接(jie)觸金屬(shu)容(rong)器、底(di)物混合(he)後放(fang)置時間較長均影(ying)響實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)的準確性。選(xuan)擇試(shi)劑(ji)時(shi)應選(xuan)擇靈敏(min)度(du)高、特異性(xing)好、穩(wen)定(ding)性(xing)好,批間差小的試(shi)劑(ji)。不(bu)同廠家的試(shi)劑(ji)不(bu)能(neng)混用,包(bao)括底(di)物和(he)洗滌(di)液(ye)。檢(jian)測前(qian)應(ying)將(jiang)試(shi)劑(ji)放(fang)置室溫(wen)平衡半小(xiao)時(shi),洗(xi)滌液(ye)應(ying)現用現配(pei),同時(shi)觀(guan)察(cha)濃(nong)縮洗滌(di)液(ye)中(zhong)有(you)無(wu)結(jie)晶,若有(you)結(jie)晶應(ying)放(fang)37℃水浴(yu)中(zhong)融(rong)化後才(cai)可(ke)使用。
二、標本因(yin)素(su)
正(zheng)確處理(li)標(biao)本(ben),防(fang)止大(da)規(gui)模溶血(xue)、血(xue)漿層(ceng)異物(wu)、使用壹次性(xing)加(jia)樣槍頭(tou),防(fang)止交叉(cha)汙染(ran)。血(xue)清和(he)血(xue)漿均可以用於(yu)檢(jian)測,但(dan)血(xue)清的分(fen)離應在抽血(xue)後(hou)等(deng)血(xue)液(ye)*凝(ning)固(gu)後(hou)再(zai)離心。
三(san)、技術(shu)人員(yuan)操(cao)作(zuo)因(yin)素(su)
嚴(yan)格按照(zhao)相關(guan)實(shi)驗(yan)SOP操(cao)作(zuo)實(shi)驗(yan)。加(jia)樣(yang)時(shi)應(ying)盡可能(neng)的垂直加樣(yang),並加(jia)在包(bao)被孔(kong)的底部(註(zhu):勿(wu)應用力(li)過(guo)度(du)破壞底(di)部包(bao)被物(wu)質),不(bu)可加在孔的上部及外(wai)部。
四、洗(xi)板(ban)機(ji)的因素(su)
廢(fei)液(ye)瓶(ping)裝滿(man)後應(ying)及時清空,以防(fang)止廢(fei)液(ye)回(hui)流(liu)對(dui)管道的汙染(ran),而使洗(xi)滌(di)不*,造成(cheng)“花(hua)板(ban)”。洗(xi)板(ban)結(jie)束(shu)後(hou)應用蒸餾水*清洗管道,以(yi)防(fang)止廢(fei)液(ye)在管道中(zhong)的殘(can)留(liu)。同(tong)時應根據儀(yi)器維(wei)護保(bao)養程序,定期(qi)對(dui)洗板(ban)機(ji)進行(xing)維(wei)護保(bao)養。
五、溫(wen)浴的因素(su)
使(shi)用水浴(yu)箱(xiang)作(zuo)為(wei)溫(wen)浴設備(bei)時,應註(zhu)意(yi)水的深淺對(dui)結(jie)果(guo)的影(ying)響,當(dang)水浴(yu)箱(xiang)中(zhong)水的的實測(ce)溫(wen)度(du)37℃時(shi),則(ze)水面(mian)溫(wen)度(du)可(ke)能(neng)只(zhi)有34℃,空氣(qi)溫(wen)度(du)更(geng)低(di),甚至只(zhi)有二(er)十(shi)多度(du),所(suo)以(yi)當(dang)水浴(yu)箱(xiang)中(zhong)水位(wei)過(guo)低(di)時則酶(mei)標微(wei)孔板(ban)沒(mei)有(you)浸(jin)入(ru)水中(zhong),則(ze)反(fan)應溫(wen)度(du)會(hui)達(da)不(bu)到(dao)37℃,相應的就會(hui)影(ying)響酶(mei)促反(fan)應。為(wei)防(fang)止邊(bian)緣效應(ying),酶(mei)標板(ban)應(ying)盡(jin)量浸(jin)入(ru)水中(zhong),以(yi)保(bao)證受熱的均勻(yun)。水浴(yu)時(shi),酶(mei)標板(ban)應(ying)封(feng)好,以(yi)免(mian)水滴(di)滴(di)入(ru)包(bao)被孔(kong)中,或(huo)陽(yang)性(xing)標(biao)本(ben)的蒸發(fa)。嚴(yan)格掌(zhang)握(wo)溫(wen)浴時(shi)間,不(bu)可(ke)為(wei)了(le)早(zao)點(dian)出結(jie)果(guo)擅(shan)自縮短溫(wen)浴時(shi)間。
六(liu)、酶(mei)標儀(yi)
酶(mei)標儀(yi)應安置在避光條件(jian)下(xia),比色(se)前(qian)應(ying)提前(qian)15-30分(fen)鐘(zhong)開機(ji)預(yu)熱(re),這樣測定(ding)結(jie)果(guo)會(hui)更穩定。為(wei)防(fang)止顯色(se)的加深或(huo)減(jian)弱(ruo),顯色(se)時(shi)間(jian)完(wan)成(cheng)後(hou)應立即(ji)滴加(jia)終止液(ye)(避免(mian)氣(qi)泡產生(sheng)),並在10分(fen)鐘(zhong)內完成(cheng)比色(se)。酶(mei)標板(ban)從(cong)水浴(yu)箱(xiang)取(qu)出後應擦(ca)凈孔(kong)底水滴(di),若有(you)水滴(di)或(huo)紙(zhi)屑(xie)殘(can)留(liu)在孔底(di),會(hui)造(zao)成(cheng)酶(mei)標儀(yi)讀(du)數(shu)錯誤,誤(wu)判(pan)定(ding)為(wei)“花(hua)板(ban)”。