目(mu)前ELISA試劑(ji)盒(he)檢測的樣(yang)本中,除(chu)了(le)細(xi)胞上清外(wai),還(hai)有(you)比較(jiao)大(da)的壹部分(fen)是血清和血漿(jiang)樣(yang)本。對於(yu)ELISA試劑(ji)盒(he)客(ke)戶(hu)來說(shuo),在(zai)實(shi)驗中可能(neng)用到(dao)不同(tong)的樣(yang)本,如何辨(bian)別所(suo)購的ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)能(neng)否測手(shou)中的樣(yang)本呢(ne)?對於(yu)zui常見的細(xi)胞上清,我(wo)們(men)大(da)家知(zhi)道(dao),培(pei)養(yang)細胞過(guo)程中,無(wu)特(te)別情(qing)況壹般是(shi)10%的牛血清加(jia)入(ru)培養(yang)基(ji)中,經(jing)過(guo)培養(yang)後,細胞的吸收消(xiao)耗(hao),zui後細胞上清中蛋(dan)白含(han)量會很(hen)少(shao),而(er)且對於(yu)壹般牛血清生產的廠(chang)家來說(shuo),在(zai)生產過(guo)程中已經(jing)去除(chu)了(le),所(suo)以對壹般ELISA而(er)言,不(bu)會影(ying)響(xiang)抗(kang)體抗(kang)原(yuan)的結(jie)合。
1、如廠家(jia)沒(mei)有(you)提供專(zhuan)門(men)用(yong)於血清血漿(jiang)樣(yang)本的緩(huan)沖(chong)液,只(zhi)是(shi)有(you)壹個籠(long)統的或統壹的稀(xi)釋液,那(na)麽(me)只(zhi)要(yao)用(yong)已知(zhi)濃度(du)的待(dai)測指標(biao)蛋(dan)白加入(ru)所(suo)測種屬(shu)的血清直接(jie)加樣(yang)和用(yong)已知(zhi)濃度(du)的待(dai)測指標(biao)蛋(dan)白加入(ru)廠家提供的統壹的緩(huan)沖(chong)液中同時檢測,也(ye)可得出該(gai)試劑(ji)盒(he)是否可(ke)直接(jie)用來檢測血清血漿(jiang)樣(yang)本。
2、如廠家(jia)沒(mei)有(you)提供專(zhuan)門(men)用(yong)於血清血漿(jiang)樣(yang)本的緩(huan)沖(chong)液,那(na)麽(me)只(zhi)要(yao)用(yong)已知(zhi)濃度(du)的待(dai)測指標(biao)蛋(dan)白加入(ru)所(suo)測種屬(shu)的血清作(zuo)為樣本加樣(yang)和用(yong)已知(zhi)濃度(du)的待(dai)測指標(biao)蛋(dan)白加入(ru)PBS緩(huan)沖(chong)液中同時檢測對比,ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)即可知(zhi)道(dao)該(gai)試劑(ji)盒(he)是否可(ke)以(yi)直接(jie)用來測血清血漿(jiang)樣(yang)本。
3、如廠家(jia)提供專(zhuan)門(men)用(yong)於血清血漿(jiang)樣(yang)本的緩(huan)沖(chong)液,可(ke)用(yong)已知(zhi)濃度(du)的待(dai)測指標(biao)蛋(dan)白加入(ru)所(suo)測種屬(shu)的血清直接(jie)加樣(yang)和用(yong)緩(huan)沖(chong)液按(an)說(shuo)明書(shu)分(fen)別加樣,也(ye)可得出結(jie)果(guo)。
如該(gai)種類(lei)型ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)樣本總(zong)量如為100μl的話(hua),壹般而(er)言,會是50μl的樣(yang)本加(jia)樣量和50μl的特(te)定(ding)的緩(huan)沖(chong)液。
在(zai)使(shi)用(yong)試劑(ji)盒(he)的過(guo)程,可將(jiang)已知(zhi)濃度(du)的蛋(dan)白用血清或血漿(jiang)調配到試劑(ji)盒(he)標定的檢測限(xian)的zui高(gao)值的2倍,加入(ru)50μl做兩(liang)孔(kong),壹孔補(bu)入(ru)常規的50μl標(biao)準品稀(xi)釋液,ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)壹孔補(bu)入(ru)50μl樣本分(fen)析緩(huan)沖(chong)液,即可區(qu)分(fen)出效(xiao)果(guo)來,有(you)時候(hou),有(you)些(xie)廠(chang)家(jia)為了達到“消(xiao)除(chu)”的效(xiao)果(guo),在(zai)樣(yang)本分(fen)析緩(huan)沖(chong)液中加入(ru)待(dai)測目(mu)標蛋(dan)白,為了鑒別出這(zhe)種(zhong)情(qing)況,也(ye)可直接(jie)加入(ru)樣本分(fen)析緩(huan)沖(chong)液做(zuo)壹孔,同(tong)時做(zuo)對比,這(zhe)樣(yang)可試(shi)出試(shi)劑(ji)盒(he)中的針對血清血漿(jiang)樣(yang)本的緩(huan)沖(chong)液是(shi)否(fou)真(zhen)的有(you)效(xiao)。