大鼠elisa試劑盒(he)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

1.標(biao)準(zhun)品(pin)的稀釋：本(ben)試劑盒(he)提(ti)供原(yuan)倍(bei)標(biao)準(zhun)品(pin)壹(yi)支，用戶可按(an)照(zhao)下(xia)列(lie)圖(tu)表(biao)在(zai)小(xiao)試管(guan)中(zhong)進(jin)行稀釋。

2.加(jia)樣：分(fen)別設空(kong)白孔(kong)（空(kong)白對(dui)照(zhao)孔(kong)不加(jia)樣品(pin)及(ji)酶標(biao)試劑，其余各步操(cao)作(zuo)相同(tong)）、標(biao)準(zhun)孔(kong)、待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標(biao)包被(bei)板(ban)上標(biao)準(zhun)品(pin)準(zhun)確加(jia)樣 50µl，待(dai)測(ce)樣品(pin)孔(kong)中(zhong)先(xian)加(jia)樣品(pin)稀釋液(ye) 40µl，然(ran)後再(zai)加(jia)待(dai)測(ce)樣品(pin) 10µl（樣(yang)品(pin)終(zhong)稀釋度(du)為(wei) 5 倍(bei)）。加(jia)樣將樣品(pin)加(jia)於酶標(biao)板(ban)孔(kong)底部，盡量不觸(chu)及(ji)孔(kong)壁，輕輕晃(huang)動(dong)混(hun)勻(yun)。

3.溫育(yu)：用封(feng)板(ban)膜(mo)封(feng)板(ban)後(hou)置(zhi) 37℃溫育(yu) 30 分(fen)鐘。

4.配(pei)液：將 30 倍(bei)濃(nong)縮洗滌(di)液用蒸餾水 30 倍(bei)稀釋後(hou)備(bei)用

5.洗滌(di)：小心(xin)揭(jie)掉(diao)封(feng)板(ban)膜(mo)，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩(shuai)幹，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗滌(di)液，靜(jing)置(zhi) 30 秒(miao)後棄(qi)去(qu)，如此重(zhong)復 5 次(ci)，拍幹。

6.加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加(jia)入酶標(biao)試劑 50µl，空白(bai)孔(kong)除(chu)外(wai)。

7.溫(wen)育(yu)：操(cao)作(zuo)同(tong) 3。

8.洗滌(di)：操(cao)作(zuo)同(tong) 5。

9.顯(xian)色：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色劑 A50µl，再(zai)加(jia)入顯(xian)色劑 B50µl，輕輕震(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯(xian)色
15 分(fen)鐘.

10.終(zhong)止：每(mei)孔(kong)加(jia)終止液(ye) 50µl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應（此時藍(lan)色立轉黃(huang)色）。

11.測(ce)定：以空白空(kong)調零，450nm 波長依序測量各(ge)孔(kong)的吸光度(du)（OD 值(zhi)）。 測定應在加(jia)終止液(ye)後(hou) 15 分(fen)鐘以(yi)內進(jin)行。