豚鼠(shu)白(bai)介(jie)素試(shi)劑盒(he)註(zhu)意(yi)事(shi)項:
1加樣:
①實(shi)驗樣(yang)本過多時,可(ke)分批(pi)次(ci)操(cao)作,以(yi)減少實(shi)驗時間延長(chang)造(zao)成的誤(wu)差(cha);
②加酶試(shi)劑後(hou),用吸(xi)水紙(zhi)吸(xi)幹孔外試(shi)劑;
③作定量試(shi)驗時,使用加樣(yang)器(qi)加(jia)註(zhu)試(shi)劑,並經(jing)常校(xiao)正(zheng)其(qi)準(zhun)確性,此(ci)外,要做(zuo)到壹份(fen)樣(yang)本壹(yi)個(ge)移液頭(tou),防止(zhi)交叉(cha)汙(wu)染(ran)。
2.溫(wen)育:
①如(ru)有兩種溫度(du),盡(jin)量使用較(jiao)低的溫(wen)育溫度(du)、較(jiao)長(chang)反應(ying)時間的條(tiao)件;
②用1個(ge)小(xiao)溫度(du)計放(fang)置在(zai)板(ban)孔反應(ying)液中測量觀察;
③96孔板(ban)周(zhou)圍孔與中心孔在溫(wen)育中的熱(re)力(li)學梯度(du)會造(zao)成“邊緣(yuan)效應(ying)”,因此(ci)盡量采(cai)用水浴;
3.洗(xi)板(ban):
①手(shou)工(gong)洗(xi)板(ban)時,拍板(ban)時要垂(chui)直(zhi),避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran),用力(li)不能過猛(meng),防止抗原(yuan)抗體復(fu)合(he)物脫(tuo)離(li);
②洗(xi)板(ban)機洗(xi)板(ban)時應(ying)經(jing)常檢查(zha)沖(chong)洗(xi)頭是否通暢(chang),若(ruo)被(bei)雜物堵(du)塞(sai)時可(ke)用註(zhu)射(she)器(qi)針頭挑(tiao)出;
③為了(le)洗(xi)滌(di)效(xiao)果(guo)好(hao),實(shi)驗室可(ke)采(cai)用機器(qi)與人(ren)工(gong)洗(xi)滌(di)相(xiang)結合(he)的方法(fa),在機器(qi)洗(xi)滌(di)後(hou)再(zai)進(jin)行人(ren)工(gong)洗(xi)板(ban)1-2次(ci),或(huo)適當(dang)增加洗(xi)板(ban)的次(ci)數(shu);
4.顯色:
ELISA試(shi)劑盒(he)中,如(ru)以(yi)四(si)甲基(ji)聯(lian)苯(ben)胺(an)(TMB)為(wei)底物,則(ze)提(ti)供的底(di)物為(wei)A和(he)B兩(liang)瓶(ping)應(ying)用液;如(ru)以(yi)鄰(lin)苯(ben)二胺(an)(OPD)為底物,則(ze)試(shi)劑盒(he)提(ti)供鄰(lin)苯(ben)二胺(an)片(pian)劑或(huo)粉劑(ji)。顯(xian)色反應(ying)條(tiao)件為(wei)37℃或(huo)室溫反應(ying)15-30 min。以(yi)鄰(lin)苯(ben)二胺(an)(OPD)為底物的試(shi)劑,要臨用前(qian)30 min配(pei)制且必須(xu)避(bi)光(guang)。以(yi)四(si)甲基(ji)聯(lian)苯(ben)胺(an)(TMB)為(wei)底物的試(shi)劑則(ze)不需避(bi)光(guang),但A、B液應(ying)盡量避(bi)免接觸(chu)金(jin)屬器(qi)械(xie)。
5.判定(ding):
讀(du)取結果要在(zai)15-30 min內(nei)完(wan)成,定(ding)性(xing)測定用肉眼(yan)判讀(du)試(shi)驗結果時,反應(ying)板(ban)應(ying)水平距(ju)離(li)白色背景(jing)10-15 cm;定(ding)量測定時用酶標(biao)儀讀取(qu)結果,酶標(biao)儀不應(ying)置於(yu)陽(yang)光(guang)或強光(guang)照(zhao)射(she)下(xia),需先(xian)預(yu)熱15-30 min再進行測試(shi)。