每壹(yi)盒(he)ELISA試(shi)劑盒(he)試(shi)劑盒(he)裏面(mian)都(dou)有(you)壹(yi)份(fen)對(dui)應(ying)的說(shuo)明(ming)書，而每壹(yi)份(fen)說(shuo)明(ming)書裏都(dou)會有(you)寫樣(yang)本和(he)稀釋液(ye)的稀釋份額，為何樣(yang)本都(dou)需(xu)求(qiu)稀釋呢(ne)？今(jin)天我(wo)們(men)就(jiu)壹起(qi)來(lai)了解下為何ELISA實驗血清(qing)樣(yang)本都(dou)需(xu)求(qiu)稀釋? 1.比賽(sai)按(an)捺對(dui)比明(ming)顯(xian)，應(ying)稀釋比賽(sai)物；
2.以(yi)下降(jiang)非特(te)異性反應(ying)，使特(te)異性的抗原抗體(ti)反應(ying)充(chong)分體(ti)現出來(lai)。
血清(qing)稀釋用壹般(ban)的PBS即可(ke)，可(ke)加(jia)1％的BSA，能有用(yong)下(xia)降ELISA本底(di)，當然(ran)假如(ru)妳嫌費事(shi)我(wo)覺(jiao)得用生(sheng)理鹽水(shui)代(dai)替PBS也(ye)不(bu)大。不(bu)管妳(ni)是(shi)用(yong)直接比賽(sai)仍(reng)是直接比賽(sai)，血(xue)清(qing)的(de)稀釋倍數(shu)必定(ding)要事(shi)前確認，但(dan)也(ye)不(bu)必壹(yi)點點，妳做(zuo)壹(yi)個預實驗即可(ke)，挑(tiao)選(xuan)OD在1.0左右(you)的稀釋倍數(shu)，即妳(ni)的(de)ELISA中(zhong)陰(yin)性(xing)孔(kong)OD在1.0，這麽作出來(lai)的曲(qu)線(xian)對(dui)比靈(ling)敏(min)。
elisa檢測(ce)試(shi)劑盒(he)實驗(yan)稀釋血清(qing)的(de)過程：
1、先(xian)把(ba)蛋白(bai)稀釋壹定的(de)倍(bei)數(shu)，比如(ru)說(shuo)10倍(bei)、20倍稀釋（這樣(yang)可(ke)以(yi)大體(ti)確認壹個(ge)參(can)數(shu)），將抗原進行壹(yi)系(xi)列(lie)稀釋包被(bei)微(wei)量(liang)反(fan)應(ying)板
2、再(zai)用(yong)壹定(ding)稀釋度的(de)陽性參(can)閱血(xue)清(qing)和(he)陰(yin)性(xing)參閱血(xue)清(qing)進行孵(fu)育後(hou)洗(xi)刷(shua)，再加(jia)酶(mei)結合物進行反(fan)應(ying)，經孵(fu)育洗刷(shua)後(hou)，加(jia)底(di)物溶液(ye)顯(xian)色(se)，停止反應(ying)後(hou)分(fen)別測定(ding)O.D值(zhi)，挑(tiao)選(xuan)O.D值(zhi)≥1.0的那個(ge)抗原稀釋度為zui適(shi)包被(bei)濃(nong)度。壹(yi)般(ban)總(zong)是要(yao)挑(tiao)選(xuan)那個(ge)O.D值(zhi)稍大於1.0，而不(bu)挑(tiao)選(xuan)小(xiao)於1.0的抗原濃(nong)度。陰(yin)性(xing)參閱血(xue)清(qing)O.D值(zhi)要求(qiu)<0.1-0.2。也(ye)便是(shi)要(yao)求(qiu)陽性參(can)閱血(xue)清(qing)和(he)陰(yin)性(xing)參閱血(xue)清(qing)的(de)O.D值(zhi)有明(ming)顯(xian)差別。
