ELISA試(shi)劑(ji)盒是壹(yi)種(zhong)敏(min)感(gan)性(xing)高(gao)，特(te)異性(xing)強(qiang)，重(zhong)復(fu)性(xing)好(hao)的(de)試(shi)驗確診(zhen)方(fang)法(fa)。盡(jin)管(guan)ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)操作(zuo)過程看(kan)似(si)簡(jian)單(dan)，但(dan)有(you)時(shi)還(hai)是會出(chu)現(xian)壹(yi)些(xie)特(te)殊的(de)問題(ti)，好比說實驗中(zhong)背景深(shen)全(quan)部(bu)呈(cheng)有(you)色（通(tong)常的(de)Elisa背景值(zhi)OD<0.2） 根(gen)據(ju)以往(wang)技(ji)術分析，可(ke)能存(cun)在的(de)原因(yin)有(you)壹(yi)下(xia)幾條(tiao)：
1、樣品(pin)稀釋液(ye)汙(wu)染
解決(jue)辦(ban)法(fa)：棄(qi)去稀釋液(ye)，重(zhong)新配置；
2、不(bu)正確的(de)孵育(yu)時(shi)間(jian)，溫(wen)度(du)（尤(you)其是底物(wu)孵(fu)育的(de)時(shi)間(jian)）
解決(jue)辦(ban)法(fa)：zui為(wei)常用的(de)溫育(yu)溫度(du)有(you)37℃和(he)室(shi)溫，其次是43℃和(he)2～8℃。*按(an)照說明書(shu)要(yao)求；
3、吸頭(tou)重(zhong)復(fu)使用，未(wei)洗凈或消(xiao)毒(du)不(bu)*
解決(jue)辦(ban)法(fa)：吸(xi)頭(tou)盡可能壹(yi)次(ci)性(xing)使(shi)用；
4、偶聯抗(kang)體(ti)（streptavidin-HRP）濃(nong)度(du)過高(gao)
解決(jue)辦(ban)法(fa)：按(an)照(zhao)說明書(shu)調整(zheng)到合(he)適的(de)濃(nong)度(du)；
5、ELISA板子(zi)不(bu)正確的(de)貯存(cun)
解決(jue)辦(ban)法(fa)：酶(mei)標板貯存(cun)於2-8 ℃；使用結(jie)合(he)力低點(dian)的(de)Elisa板；
6、實驗過程中(zhong)洗滌(di)不(bu)充(chong)分，洗後(hou)未(wei)拍幹(gan)，樣品(pin)中(zhong)其它(ta)成分殘留或酶(mei)標記(ji)物(wu)殘留
解決(jue)辦(ban)法(fa)：洗(xi)液(ye)準確配制；充分洗滌(di)，靜置15秒，*拍幹(gan)。加樣或加酶(mei)拍板的(de)濾(lv)紙(zhi)應棄(qi)去不(bu)用，不(bu)要(yao)反復(fu)使用，否(fou)則(ze)易造成汙(wu)染；
7、沒(mei)有(you)正確封閉(bi)
解決(jue)辦(ban)法(fa)：在(zai)標準品(pin)稀釋液(ye)中(zhong)加入(ru)動物(wu)蛋(dan)白(bai)或延(yan)長封閉(bi)時(shi)間(jian)；
8、底(di)物汙(wu)染，未(wei)避光(guang)保(bao)存(cun)，出(chu)現(xian)顏(yan)色
解決(jue)辦(ban)法(fa)：棄(qi)去底(di)物，重(zhong)新配置；
9、樣本溶(rong)血(xue)嚴(yan)重(zhong)
解決(jue)辦(ban)法(fa)：建議使用非(fei)溶(rong)血(xue)或輕微溶血(xue)樣本，嚴(yan)重(zhong)溶(rong)血(xue)樣本會導致背景偏(pian)高。
