ELISA試劑盒(he)樣本處(chu)理及要(yao)求(qiu): 1、血(xue)清(qing):室(shi)溫(wen)血(xue)液自然(ran)凝固10-20分(fen)鐘(zhong),離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如出(chu)現(xian)沈澱(dian),應(ying)再(zai)次離心(xin)。
血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)宜(yi)在新(xin)鮮(xian)時檢測(ce)。如有細菌汙(wu)染(ran),菌體(ti)中(zhong)可能(neng)含有內源(yuan)性HRP,也會(hui)產(chan)生(sheng)假(jia)陽(yang)性反(fan)應(ying)。如在冰(bing)箱中(zhong)保存過久(jiu),其間的可發(fa)生(sheng)聚(ju)合(he),在間接法ELISA中可使本(ben)底加(jia)深(shen)。壹(yi)般說(shuo)來,在5天內測定(ding)的血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)可放(fang)置於(yu)4℃,超過壹周(zhou)測(ce)定(ding)的需(xu)低(di)溫(wen)冰(bing)存。凍(dong)結血清(qing)融解(jie)後(hou),蛋白質部(bu)分濃(nong)縮,散布(bu)不均,應(ying)充沛混(hun)勻(yun)宜(yi)輕(qing)緩,防止(zhi)氣泡(pao),可上(shang)下顛(dian)倒(dao)混(hun)和,不要(yao)在混(hun)勻(yun)器上(shang)激(ji)烈振蕩。混(hun)濁(zhuo)或有沈積的血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)應(ying)先離心(xin)或(huo)過濾,弄清(qing)後(hou)再(zai)檢測(ce)。重復(fu)凍(dong)融會(hui)使抗(kang)體(ti)效價(jia)下(xia)跌,所(suo)以測(ce)抗體(ti)的血(xue)清(qing)標(biao)本(ben)如需(xu)保存作屢次檢測(ce),宜(yi)少(shao)量(liang)分裝(zhuang)冰(bing)存。保存血清(qing)自(zi)收(shou)集(ji)時就(jiu)應(ying)註(zhu)意(yi)無(wu)菌操(cao)作,也可參加(jia)恰當防(fang)腐(fu)劑。
2、血(xue)漿(jiang):應(ying)根據標本的要(yao)求(qiu)選擇EDTA或(huo)檸(ning)檬酸(suan)鈉作為抗(kang)凝劑,混(hun)合(he)10-20分鐘後(hou),離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如有沈澱(dian)形成(cheng),應(ying)該再(zai)次離心(xin)。

3、組織標本:切割(ge)標(biao)本(ben)後,稱取重量。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS,PH7.4。用(yong)液(ye)氮(dan)迅速冷凍(dong)保存備(bei)用。標(biao)本(ben)融化(hua)後仍然(ran)保持(chi)2-8℃的溫(wen)度。加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)量(liang)的PBS(PH7.4),用(yong)手(shou)工(gong)或勻(yun)漿(jiang)器將標(biao)本(ben)勻漿(jiang)充分(fen)。離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing)。分(fen)裝(zhuang)後壹(yi)份待(dai)檢測(ce),其余(yu)冷(leng)凍(dong)備(bei)用。
4、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing):檢測(ce)分泌(mi)性(xing)的成(cheng)份時,用無菌管(guan)收集(ji)。離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing)。檢測(ce)細胞(bao)內的成(cheng)份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀(xi)釋細(xi)胞懸液(ye),細胞濃度達(da)到100萬/ml左右(you)。通(tong)過反復(fu)凍(dong)融,以(yi)使細(xi)胞破(po)壞並(bing)放(fang)出(chu)細胞(bao)內成份。離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing)。保存過程中如有沈澱(dian)形成(cheng),應(ying)再(zai)次離心(xin)。
5、尿(niao)液:用(yong)無菌管(guan)收集(ji),離心(xin)20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉(zhuan)/分(fen))。仔(zai)細(xi)收集(ji)上(shang)清(qing),保存過程中如有沈澱(dian)形成(cheng),應(ying)再(zai)次離心(xin)。胸腹水(shui)、腦脊(ji)液(ye)參照(zhao)實行(xing)。
6、標本(ben)采集(ji)後盡(jin)早(zao)進行(xing)提取,提取按相關(guan)文(wen)獻(xian)進行(xing),提取後應(ying)盡快進行(xing)實驗。若不能(neng)馬上(shang)進行(xing)試驗,可將標(biao)本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保存,但應(ying)避免反復(fu)凍(dong)融。