人血(xue)纖蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA試劑(ji)盒操作(zuo)註(zhu)意(yi)事項
1. 試劑(ji)應按(an)標簽(qian)說明(ming)書儲(chu)存,使(shi)用前恢(hui)復到(dao)室溫(wen)。稀稀過(guo)後的標準(zhun)品應丟棄,不可(ke)保存(cun)。
2. 實驗中不用的板(ban)條(tiao)應立即(ji)放(fang)回(hui)包裝(zhuang)袋(dai)中,密(mi)封(feng)保(bao)存,以免(mian)變質(zhi)。
3. 不用的其(qi)它(ta)試劑(ji)應包(bao)裝好(hao)或(huo)蓋(gai)好(hao)。不同(tong)批(pi)號(hao)的試(shi)劑(ji)不要混用。保質(zhi)前使(shi)用。
4. 使(shi)用壹次(ci)性(xing)的吸(xi)頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染,吸(xi)取(qu)終止(zhi)液(ye)和底(di)物(wu)A、B液(ye)時,避(bi)免(mian)使(shi)用帶(dai)金(jin)屬部(bu)分的加樣器。
5. 使(shi)用幹凈(jing)的塑(su)料(liao)容器配(pei)置洗滌液(ye)。使(shi)用前充分混勻試劑(ji)盒裏(li)的各(ge)種成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品。
6. 洗滌酶(mei)標板時(shi)應充分拍(pai)幹(gan),不要將(jiang)吸(xi)水紙(zhi)直接放(fang)入酶(mei)標反應(ying)孔中吸(xi)水。
7. 底(di)物(wu)A應揮發,避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)打開(kai)蓋(gai)子(zi)。底(di)物(wu)B對(dui)光敏(min)感,避(bi)免(mian)長(chang)時(shi)間(jian)暴(bao)露(lu)於光下(xia)。避(bi)免(mian)用手接觸(chu),有毒。實驗完成(cheng)後應(ying)立即(ji)讀(du)取(qu)OD值(zhi)。
8. 加入人血(xue)纖蛋(dan)白原(yuan)(Fbg)ELISA試劑(ji)盒試(shi)劑(ji)的順(shun)序(xu)應(ying)壹(yi)致(zhi),以保證(zheng)所有反應板孔(kong)溫(wen)育(yu)的時(shi)間(jian)壹樣(yang)。
9. 按(an)照說明(ming)書中(zhong)標明的時(shi)間(jian)、加液(ye)的量及(ji)順(shun)序(xu)進(jin)行溫育(yu)操作(zuo)
Elisa試劑(ji)盒樣(yang)品收(shou)集,處理及(ji)保(bao)存方法
1、 血(xue)清:操作(zuo)過程(cheng)中避(bi)免(mian)任(ren)何細胞(bao)刺(ci)激(ji)。使(shi)用不含熱原(yuan)和內毒素的試(shi)管(guan)。收(shou)集血(xue)液(ye)後,1000×g離(li)心(xin)10分鐘將(jiang)血(xue)紅細胞(bao)迅速(su)小心(xin)地(di)分離(li)。
2、 血(xue)漿:EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽(yan)、肝素血(xue)漿可(ke)用於檢測(ce)。1000×g離(li)心(xin)30分鐘去除顆粒(li)。
3、 細胞(bao)上(shang)清液(ye):1000×g離(li)心(xin)10分鐘去除顆粒(li)和聚合物。
4、 組織勻漿:將組織加入適(shi)量生(sheng)理鹽(yan)水搗碎(sui)。1000×g離(li)心(xin)10分鐘,取(qu)上(shang)清液(ye)。
5、 保存:如(ru)果(guo)樣品(pin)不立即(ji)使(shi)用,應將(jiang)其(qi)分成(cheng)小部(bu)分-70℃保(bao)存(cun),避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)冷(leng)凍(dong)。盡(jin)可(ke)能(neng)的不要使(shi)用溶(rong)血(xue)或(huo)高血(xue)脂血(xue)。如果(guo)血(xue)清中(zhong)大(da)量顆粒(li),檢測前先(xian)離(li)心(xin)或(huo)過濾。不要在(zai)37℃或(huo)更高的溫(wen)度(du)加熱解(jie)凍(dong)。應(ying)在(zai)室溫(wen)下解(jie)凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品均(jun)勻地(di)充分解(jie)凍(dong)。