ELISA（酶聯免(mian)疫吸附(fu)實(shi)驗(yan)）試劑(ji)盒(he)廣(guang)泛(fan)用(yong)於檢測特定(ding)蛋(dan)白(bai)質(zhi)或(huo)其(qi)他生物分(fen)子的(de)存(cun)在和(he)濃(nong)度。其穩(wen)定(ding)性對實(shi)驗(yan)結(jie)果的(de)準確(que)性至(zhi)關重(zhong)要(yao)，而(er)試劑(ji)過(guo)期是影響穩(wen)定(ding)性的(de)重要(yao)因素(su)之(zhi)壹。要判(pan)斷(duan)ELISA試劑(ji)是(shi)否過期，需(xu)結(jie)合(he)標(biao)準曲(qu)線R²值、質(zhi)控樣(yang)品檢測結(jie)果及(ji)有(you)效(xiao)期管(guan)理(li)進(jin)行綜(zong)合(he)評(ping)估(gu)。以(yi)下(xia)是(shi)具體判(pan)斷(duan)方(fang)法(fa)：

壹、通過標準(zhun)曲線R²值判(pan)斷(duan)

標準(zhun)曲線的(de)擬合(he)優(you)度（R²值）是(shi)評(ping)估(gu)試劑(ji)活(huo)性的(de)關鍵(jian)指(zhi)標(biao)。若R²值顯(xian)著下(xia)降(jiang)（如(ru)低(di)於0.99），可(ke)能(neng)提(ti)示(shi)試劑(ji)失(shi)效(xiao)。例如：

‌理(li)想標(biao)準(zhun)‌：R²應≥0.99（四參(can)數邏輯(ji)回(hui)歸(gui)模(mo)型(xing)）。

‌異常(chang)情況‌：若R²值低(di)於0.98，需(xu)排查(zha)試劑(ji)是(shi)否降解或操作(zuo)誤差(cha)。

二、通過質控(kong)樣(yang)品檢測結(jie)果判(pan)斷(duan)

質控(kong)樣(yang)品（QC）的(de)檢測結(jie)果可(ke)反(fan)映試劑(ji)批(pi)間(jian)穩定(ding)性：

‌精密度要求(qiu)‌：質(zhi)控樣(yang)品的(de)批(pi)內變異(yi)系(xi)數（CV）應<10%，批(pi)間(jian)差(cha)異應(ying)<15%。

‌回(hui)收(shou)率驗(yan)證‌：向(xiang)樣(yang)本中添(tian)加已知濃(nong)度標準(zhun)品(pin)，回(hui)收(shou)率應(ying)在(zai)80%-120%範圍內。若結(jie)果偏離(li)此範(fan)圍，可(ke)能(neng)提(ti)示(shi)試劑(ji)失(shi)效(xiao)。

三、通過有效(xiao)期管(guan)理(li)判(pan)斷(duan)

試劑(ji)盒(he)的(de)有效(xiao)期是判(pan)斷(duan)過(guo)期的(de)最(zui)直(zhi)接(jie)依(yi)據：

‌嚴(yan)格遵(zun)循(xun)有效(xiao)期‌：超過有效(xiao)期的(de)試劑(ji)需(xu)立(li)即(ji)停(ting)用(yong)，即(ji)使(shi)外觀(guan)無(wu)異常(chang)。

‌存(cun)儲條(tiao)件監(jian)控‌：未開(kai)封(feng)試劑(ji)需(xu)按說(shuo)明書(shu)要(yao)求(qiu)保存(cun)（如2-8℃或-20℃），避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融導致(zhi)性能(neng)下(xia)降(jiang)。

為(wei)了確(que)保ELISA實(shi)驗(yan)的(de)準確(que)性，建(jian)議在使用(yong)試劑(ji)盒(he)前：

1、檢查有效(xiao)期：確(que)認(ren)試劑(ji)未過期。

2、觀(guan)察(cha)試劑(ji)狀(zhuang)態(tai)：檢查顯(xian)色系(xi)統(tong)是(shi)否正常(chang)、抗體效(xiao)價(jia)是否下(xia)降(jiang)。

3、進(jin)行質控實(shi)驗(yan)：通過標準(zhun)曲線和精密度測試驗(yan)證試劑(ji)的(de)穩定(ding)性。

如果(guo)試劑(ji)已經(jing)過(guo)期或狀態(tai)異(yi)常(chang)，建議更(geng)換(huan)新的(de)試劑(ji)盒(he)以避(bi)免(mian)實(shi)驗(yan)失(shi)敗。通過以上方(fang)法(fa)可(ke)系(xi)統評(ping)估(gu)試劑(ji)狀(zhuang)態(tai)，確(que)保實(shi)驗(yan)數據的(de)可(ke)靠(kao)性。