多(duo)克隆(long)抗(kang)體（Polyclonal Antibody，Pab）是(shi)由(you)多種B細胞(bao)克(ke)隆產生的，能夠(gou)識(shi)別同壹抗(kang)原分(fen)子上(shang)多(duo)個不(bu)同表位的抗體混合物。克隆抗(kang)體的識別特(te)性在於它們能結(jie)合抗原的多個不(bu)同區域(yu)，這(zhe)使得(de)它(ta)們(men)在檢(jian)測(ce)低(di)豐度(du)蛋白(bai)、變(bian)性或(huo)修飾(shi)蛋白(bai)、以及跨(kua)物種保(bao)守(shou)蛋白(bai)時具(ju)有優(you)勢(shi)。它(ta)們(men)適(shi)用於初篩實(shi)驗和成(cheng)本(ben)較低(di)的研究，但特(te)異性可能不(bu)如(ru)單克(ke)隆(long)抗(kang)體，且(qie)批(pi)次間(jian)可能存(cun)在(zai)差異。

壹、多(duo)克隆(long)抗(kang)體的制備(bei)原理(li)

1、免(mian)疫(yi)原的準備(bei)：選擇(ze)合適的抗原，可以是(shi)蛋白(bai)質、多肽、脂(zhi)蛋白(bai)、多糖(tang)或(huo)核(he)酸(suan)等，這些抗原需經過(guo)純(chun)化和處理(li)，以(yi)增(zeng)強(qiang)其(qi)免疫(yi)原性。

2、動(dong)物免疫：將(jiang)抗(kang)原與(yu)佐劑混合後(hou)，通(tong)過(guo)皮(pi)下註射(she)、腹(fu)腔(qiang)註射或(huo)肌肉(rou)註(zhu)射(she)的方式，將混合物註射到(dao)動(dong)物體內，如(ru)兔(tu)子、小(xiao)鼠或(huo)大鼠。免(mian)疫(yi)過(guo)程(cheng)通(tong)常(chang)需要(yao)多(duo)次(ci)，以(yi)增(zeng)強(qiang)免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)。

3、佐劑的選擇(ze)與(yu)使用：佐劑是用於增強(qiang)抗(kang)原免(mian)疫(yi)原性的輔助劑，常(chang)見(jian)的有弗(fu)氏(shi)wanquan佐劑和弗(fu)氏(shi)不(bu)wanquan佐劑。佐劑的使用可以顯著(zhu)提(ti)高(gao)抗(kang)體的產量和特(te)異性。

4、血(xue)清(qing)的收集與(yu)純(chun)化：在免疫(yi)後(hou)壹段(duan)時間(jian)，通(tong)過(guo)耳(er)動(dong)脈(mai)或(huo)心(xin)臟(zang)采血，分(fen)離(li)血清，從中(zhong)提(ti)取(qu)多(duo)克(ke)隆(long)抗體。血(xue)清(qing)中的抗體需要(yao)通(tong)過(guo)層(ceng)析(xi)、凝(ning)膠過(guo)濾(lv)或(huo)親(qin)和(he)層(ceng)析(xi)等方法(fa)進行純化。

5、抗(kang)體的產生：免疫後(hou)的動(dong)物體內，抗(kang)原刺(ci)激(ji)B細胞(bao)產生特(te)異性抗體，這(zhe)些(xie)抗體主(zhu)要(yao)存(cun)在(zai)於血液中。

二(er)、多(duo)克隆(long)抗(kang)體的制備(bei)過(guo)程(cheng)

1、抗(kang)原制備(bei)：選擇(ze)合適的抗原，可以是(shi)蛋白(bai)質、多肽、脂(zhi)蛋白(bai)、多糖(tang)或(huo)核(he)酸(suan)等。

2、取(qu)血(xue)：在(zai)免(mian)疫後(hou)壹定(ding)時(shi)間(jian)，通(tong)過(guo)耳(er)靜(jing)脈(mai)或(huo)頸動(dong)脈(mai)放血(xue)收集血(xue)清(qing)，制備(bei)多(duo)克(ke)隆抗體。

3、免(mian)疫(yi)程序(xu)：將(jiang)抗(kang)原與(yu)佐劑乳化，註射到(dao)動(dong)物體內，刺(ci)激(ji)免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying)。shouci免疫通(tong)常(chang)使用弗(fu)氏(shi)wanquan佐劑，後(hou)續使用弗(fu)氏(shi)不(bu)wanquan佐劑。

三(san)、註(zhu)意事(shi)項(xiang)：

1、佐劑的選擇(ze)：佐劑的類(lei)型和(he)使用量對免(mian)疫(yi)效果(guo)有(you)重(zhong)要(yao)影(ying)響(xiang)。

2、動(dong)物的選擇(ze)：通(tong)常(chang)選擇(ze)與(yu)抗(kang)原物種遠親(qin)緣(yuan)的動(dong)物，以避(bi)免(mian)交叉(cha)反(fan)應(ying)。

3、免(mian)疫(yi)原性：抗(kang)原需具(ju)有良(liang)好的免疫原性，否則難以產生有效的免疫反(fan)應(ying)。

4、免(mian)疫(yi)程序(xu)：免(mian)疫(yi)次數、間(jian)隔時間(jian)、免(mian)疫途徑等需要(yao)根(gen)據(ju)抗原特(te)性調(tiao)整。

5、抗(kang)體純(chun)化：純(chun)化過(guo)程(cheng)需要(yao)嚴(yan)格控(kong)制，以保(bao)證(zheng)抗體的純度(du)和活性。

整個過(guo)程(cheng)需要(yao)嚴(yan)格的無菌(jun)操(cao)作(zuo)和(he)質(zhi)量控(kong)制，以確保(bao)抗(kang)體的特(te)異性和效(xiao)價。多(duo)克(ke)隆抗(kang)體因其(qi)多表(biao)位識別(bie)特(te)性，在檢(jian)測(ce)低(di)豐度(du)蛋白(bai)、變(bian)性蛋白(bai)和保(bao)守(shou)蛋白(bai)的跨(kua)物種檢(jian)測(ce)中(zhong)具(ju)有優(you)勢(shi)。多(duo)克(ke)隆(long)抗體的優(you)勢(shi)在(zai)於它們能識(shi)別(bie)抗原的多個表位，因此在某些(xie)應(ying)用中更為有(you)效(xiao)。