ELISA酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)實驗(yan)原理(li):免(mian)疫(yi)分析(xi)是(shi)壹(yi)種利用特(te)定抗體(ti)與(yu)抗(kang)原或(huo)半抗原發生(sheng)的(de)高選(xuan)擇性高(gao)特(te)異性識(shi)別(bie)和(he)結合原理(li),對待(dai)測抗(kang)體(ti)或者(zhe)抗原進(jin)行(xing)分析(xi)測定的方(fang)法,酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)分析(xi)(下(xia)稱(cheng)ELISA)是(shi)免(mian)疫(yi)分析(xi)的(de)壹(yi)種,分三個部分組(zu)成(cheng):免(mian)疫(yi)識(shi)別(bie),信(xin)號輸(shu)出(chu)和(he)數(shu)據處(chu)理(li)。
影(ying)響酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)試(shi)驗(yan)ELISA結果(guo)的因(yin)素有(you)哪(na)些(xie)?
主(zhu)要(yao)包括(kuo)檢測板(ban)、包(bao)被緩沖液(ye)、捕(bu)獲(huo)抗體、封(feng)閉緩沖液(ye)、靶(ba)抗原、檢(jian)測抗(kang)體(ti)、酶偶(ou)聯(lian)物(wu)、洗(xi)滌液(ye)、底(di)物(wu)、信號檢(jian)測的(de)質(zhi)量和(he)完(wan)整(zheng)性(xing)都(dou)會幹擾(rao)正確的 ELISA 測試(shi)。壹(yi)些(xie)可(ke)能(neng)幹擾(rao)測試(shi)的(de)因(yin)素如下:
1. 微(wei)孔(kong)板(ban):孔(kong)的(de)形狀和(he)質(zhi)量、板的(de)材(cai)料(liao)、潛在(zai)的預激(ji)活(huo)、均勻或不均(jun)勻的塗層
2.緩(huan)沖(chong)液(ye):pH、汙(wu)染
3.捕獲(huo)和(he)檢(jian)測抗(kang)體(ti):孵(fu)育(yu)時間(jian)、溫(wen)度、特(te)異性、滴度、親(qin)和(he)力(li)
4.封(feng)閉緩沖液(ye):交(jiao)叉反應、濃(nong)度、汙(wu)染
5.靶抗(kang)原:構(gou)象(xiang)、穩定性、表(biao)位(wei)
6.酶(mei)結合物(wu):類(lei)型(xing)、濃(nong)度、功能、交(jiao)叉反(fan)應
7.清(qing)洗(xi):汙(wu)染、頻率、體積、持(chi)續時間(jian)、成(cheng)分
8.基板:微(wei)孔(kong)板(ban)的質(zhi)量、材(cai)質(zhi)
9.檢(jian)測:檢(jian)測相關的(de)儀器(qi)設備:比如:分光(guang)光(guang)度計、讀板(ban)機(ji)等(deng)相關因(yin)素
10. 誤差:人為(wei)誤差(cha)(實驗(yan)步(bu)驟(zhou)不規(gui)範(fan)等(deng))